沙漠小球藻转植物表达载体的表达预测

• 作者: 汪文伦 牟云 王丹 胡梦薇 许万云 高剑峰
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 沙漠小球藻 电转化 植物表达载体 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 41-44,45
• 页数: 5页
• 分类号: S917.1
• 字数: 4509字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2016.06.009

摘要

以建立小球藻（沙漠小球藻）表达系统为目的，为利用小球藻重组表达外源蛋白，以及GFP荧光特性研究沙漠中的小球藻生理及理化性质提供基础方法；同时也探索植物表达载体pCAMBIA2300－35 S－OCS能否在沙漠小球藻中表达。通过菌落PCR验证E．coli DH5α是否含有目的基因（GFP基因）的重组植物表达载体pCAMBIA2300－35S－GFP－OCS，然后从E．coli DH5α中提取也构建完成的重组植物表达载体pCAMBIA2300－35S－GFP－OCS；利用电转化的方法将重组植物表达载体pCAMBIA2300－35 S－GFP－OCS转入到小球藻细胞中；将电转的小球藻在含有100 mg／L 卡那霉素的BBM固体培养基中筛选出单克隆，将单克隆在含有15 mg／L卡那霉素的BBM液体培养基中扩大培养，然后利用PCR和RT－PCR预测绿色荧光蛋白基因（GFP基因）的存在与否和表达情况，再利用SDS－PAGE和荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。通过SDS－PAGE和荧光倒置显微镜观察结果表明绿色荧光蛋白（GFP）在小球藻中表达成功。试验结果表明重组植物表达pCAMBIA2300－35 S－OCS能够在小球藻中表达外源蛋白，以及利用GFP的荧光特性研究小球藻的生理生化差异；也为小球藻在沙漠环境上的应用提供基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高剑峰	石河子大学生命科学学院	92	349	9.0	13.0
2	王丹	石河子大学生命科学学院	35	161	6.0	10.0
3	胡梦薇	石河子大学生命科学学院	10	10	2.0	2.0
4	许万云	石河子大学生命科学学院	9	13	2.0	3.0
5	汪文伦	石河子大学生命科学学院	12	17	2.0	3.0
6	牟云	石河子大学生命科学学院	7	5	2.0	2.0