NAMPT真核表达载体构建及其对肝癌细胞增殖的影响

• 作者: 任婷婷 吴有盛 张卉 朱剑军 王姣姣 邢金良 金明朋
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 尼克酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT) 细胞增殖 肿瘤代谢 载体构建
• 年，卷（期）: 2016,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2401-2404
• 分类号: R735.7|R-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.13.001

摘要

目的:为探索烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)对肝癌细胞增殖的影响,构建pcDNA3.1 (+)-NAMPT真核表达载体.方法:以正常肝细胞的cDNA为模板,通过PCR扩增得到NAMPT全长序列,经酶切、连接、转化等步骤构建真核表达载体.重组质粒经酶切鉴定及测序验证后,用脂质体转染法转染肝癌细胞MHCC-97H和正常肝细胞HL-7702,免疫印迹检测NAMPT蛋白表达情况;WST实验检测过表达NAMPT后对MHCC-97H和HL-7702增殖的影响.结果:真核表达载体pcDNA3.1 (+)-NAMPT构建成功,转染HL.-7702和MHCC-97H细胞后,NAMPT蛋白表达水平较空白组分别升高了83％和180％;过表达NAMPT可促进细胞增殖,而抑制NAMPT活性后,细胞增殖被抑制(P＜0.001).结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1 (+)-NAMPT,并发现NAMPT表达水平与细胞增殖密切相关,为进一步探索NAMPT表达在肝癌细胞增殖的分子作用机制和筛选新的肿瘤药物靶点奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢金良	第四军医大学基础部教学实验中心	35	135	8.0	9.0
2	吴有盛	第四军医大学基础部教学实验中心	14	46	4.0	6.0
3	任婷婷	第四军医大学基础部教学实验中心	4	5	1.0	2.0
4	王姣姣	第四军医大学基础部教学实验中心	2	1	1.0	1.0
5	朱剑军	第四军医大学基础部教学实验中心	1	1	1.0	1.0
6	张卉	第四军医大学唐都医院疼痛介入科	5	2	1.0	1.0
7	金明朋	第四军医大学基础部教学实验中心	1	1	1.0	1.0