双重实时荧光RT-PCR法检测肠道病毒方法的建立及应用

• 作者: 岳玉林 楚鹰 王永仿 蒋立新 许联红
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 手足口病 肠道病毒 肠道病毒71型 双重实时荧光RT-PCR
• 年，卷（期）: 2016,（33）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4688-4690,4741
• 页数: 4页
• 分类号: R512.5|Q93-33
• 字数: 3276字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2016.33.026

摘要

目的 建立检测肠道病毒(EV)和肠道病毒71型(EV71)的双重实时荧光RT-PCR法.方法 设计特异性引物和探针,建立双重实时荧光RT-PCR反应体系,绘制标准曲线,对该方法的灵敏度、精密度等进行评价.收集109例临床手足口病患者粪便和咽拭子标本用该法进行检测,并与EV71商品化试剂盒检测结果进行比较.结果 双重荧光PCR法建立的EV和EV71标准曲线相关系数(r)均为0.998;该法检测EV和EV71的灵敏度分别达到0.5 TCID50/mL和0.05 TCID50/mL;检测EV和EV71的批内精密度均小于3％,总精密度均小于或等于4％;对肠道病毒及其他人类非肠道病毒进行检测,显示了良好的特异性.109例临床样本用该法检测出84例EV病毒阳性样本,其中EV71阳性56例,EV71总阳性率为51.4％;与单重荧光PCR商品化试剂盒的检测结果完全一致(P=1.000).结论 建立的双重实时荧光RT-PCR法灵敏度高、稳定性好,对手足口病的早期高通量快速诊断具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋立新	江苏大学附属武进医院检验科	16	60	4.0	7.0
2	许联红	江苏大学附属武进医院检验科	32	117	5.0	7.0
3	王永仿	江苏大学附属武进医院检验科	13	48	4.0	5.0
4	楚鹰	江苏大学附属武进医院检验科	6	26	3.0	5.0
5	岳玉林	江苏省南京市儿童医院检验科	1	3	1.0	1.0