棉花GhGGPase2基因克隆、功能序列分析、原核表达及烟草的遗传转化

• 作者: 尹秀 左晓宇 李鸿彬 梁卓 禄亚洲
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花纤维 L-半乳糖磷酸化酶基因 原核表达 克隆 遗传转化
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: S562.032
• 字数: 5190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2016.07.007

摘要

以棉花纤维组织为材料，根据NCBI棉花EST进行同源搜索、比对和序列拼接，经RT－PCR从陆地棉纤维组织中扩增得到L－半乳糖磷酸化酶基因（GhGGPase2）的cDNA开放阅读框为1335 bp，为包含445个氨基酸的蛋白质，分子质量约为49 ku。利用软件进行蛋白质序列分析，GhGGPase2蛋白具有组氨酸三聚体（HIT）蛋白超家族的主要特性的结构域。进化树分析的结果表明棉花GhGGPase2与猕猴桃AdGGPase在进化上亲缘关系上较近。构建原核表达载体pET28a－GhGGPase2并转化大肠杆菌，将重组载体pET28a－GhGGPase2导入大肠杆菌BL21（DE3）中通过IPTG诱导表达后经过 SDS －PAGE 分析，显示成功获得分子质量为49 ku 左右的诱导表达蛋白 GhGGPase2。将GhGGPase2基因构建到植物真核表达载体pCAMBIA2300中，利用农杆菌通过叶盘法转化烟草，经PCR分子鉴定，获得了含GhGGPase2转基因烟草植株。研究结果将为进一步阐明该基因的生物学功能奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁卓	石河子大学生命科学学院	8	12	2.0	3.0
2	禄亚洲	西藏大学农牧学院	1	1	1.0	1.0
3	尹秀	西藏大学农牧学院	1	1	1.0	1.0
4	左晓宇	石河子大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0