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摘要:
目的 观察治疗性低温(TH)在缺氧期对心肌细胞自噬活性及自噬流的影响,并探讨其作用机制.方法 取大鼠心肌细胞株H9c2,分为对照组、缺氧组、TH干预组、雷帕霉素干预组、雷帕霉素+TH干预组,对照组置于37℃培养箱中培养,不作处理;缺氧组和TH干预组构建缺氧模型后,分别置于37、32℃培养箱中培养;雷帕霉素干预组和雷帕霉素+ TH干预组于构建模型前2h加入雷帕霉素0.1μmol/L,构建模型后分别置于37、32℃培养箱中培养.采用Western blot法检测对照组、缺氧组和TH干预组自噬相关蛋白自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、p62、Beclin-1蛋白表达,以及应用雷帕霉素前后哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6(S6)的表达差异;采用腺病毒GFP-mRFP-LC3荧光瞬时转染技术检测自噬流.结果 ①对照组、缺氧组和TH干预组LC3B、p62、Beclin-1蛋白表达:缺氧组和TH干预组LC3B、Beclin-1高于对照组(P均<0.05),缺氧组p62降低(P<0.05).TH干预组LC3B明显低于缺氧组,p62增高(P均<0.05).缺氧组与TH干预组Beclin-1无统计学差异.②雷帕霉素处理后自噬蛋白LC3B、p62及mTOR通路相关蛋白p-mTOR、p-S6表达:TH干预组与缺氧组比较LC3B降低,而p62、p-mTOR和p-S6均升高(P均<0.05);雷帕霉素干预组与缺氧组比较LC3B升高,p62降低(P均<0.05),而p-mTOR和p-S6差异无统计学意义;雷帕霉素+TH干预组与TH干预组比较LC3B升高,p62、p-mTOR和p-S6均降低,结果均有统计学差异(P均<0.05);雷帕霉素+TH干预组与雷帕霉素干预组比较LC3B降低,p62升高(P均<0.05),而p-mTOR和p-S6差异无统计学意义.③双荧光自噬流:缺氧组和TH干预组的黄点和红点数多于对照组(P均<0.05),TH干预组的黄点与红点数少于缺氧组(P均<0.05).结论 TH能够抑制缺氧期心肌细胞自噬,其机制可能与促进mTOR信号通路相关蛋白表达有关.
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关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 治疗性低温对缺氧期心肌细胞自噬的影响及机制
来源期刊 山东医药 学科 医学
关键词 治疗性低温 心肌细胞 缺氧 自噬 雷帕霉素
年,卷(期) 2016,(22) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1-4
页数 4页 分类号 R541.2
字数 3238字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.22.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈爱华 44 374 12.0 16.0
2 王先宝 13 73 4.0 8.0
3 杨羽菲 2 6 2.0 2.0
4 赵丛 5 13 3.0 3.0
5 杨平珍 12 25 3.0 4.0
6 邓意 1 4 1.0 1.0
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山东医药
周刊
1002-266X
37-1156/R
大16开
济南市燕东新路6号
24-8
1957
chi
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