miR-214在狼疮性肾炎小鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用及其机制

• 作者: 姚东升 姚菲菲 孙立秋 崔蕊 徐佳 方伟 王化民 王秀梅 王莉
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 狼疮性肾炎 微小RNA-214 肾小球系膜细胞 细胞增殖 YKL-40 小鼠
• 年，卷（期）: 2016,（48）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: R593.2424
• 字数: 3746字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.48.005

摘要

目的 探讨微小RNA-214 (miR-214)在狼疮性肾炎(LN)小鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用及其相关机制.方法 将MRL-Faslpr/JNju小鼠(简称LN小鼠,20只)和野生型小鼠(20只)处死,分离、培养其肾小球系膜细胞;将LN小鼠肾小球系膜细胞随机分为两组,分别转染miR-214 mimics(观察组)和NC mimics control(对照组).采用实时荧光定量PCR法检测两种小鼠及两组肾小球系膜细胞miR-214相对表达量,采用MTT法检测两组转染1、2、3天的细胞增殖抑制率.采用生物信息学方法预测细胞中miR-214的靶基因,并经双荧光素酶报告基因试验验证,YKL-40是miR-214的靶基因.采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测两组YKL-40 mRNA及蛋白相对表达量.取对数生长期的LN小鼠肾小球系膜细胞,分别转染siYKL-40和negative control,采用MTT法检测转染1、2、3天的细胞增殖抑制率.结果 LN小鼠和野生型小鼠肾小球系膜细胞miR-214相对表达量分别为0.35±0.09、1,两者比较P＜0.01.观察组和对照组miR-214相对表达量分别为85.54±12.07、1,两组比较P＜0.01.观察组转染1、2、3天的细胞增殖抑制率均高于对照组(P＜0.05或＜0.01).与对照组比较,观察组YKL-40 mRNA及蛋白相对表达量均降低(P均＜0.05).与转染negative control比较,转染siYKL-40的LN小鼠肾小球系膜细胞转染1、2、3天的细胞增殖抑制率均升高(P＜0.05或＜0.01).结论 LN小鼠肾小球系膜细胞中miR-214表达降低,上调miR-214表达可抑制其增殖;下调YKL-40表达可能是miR-214的作用机制.