捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体获得与再生的荧光标记评价

• 作者: 张伟 杨晓野 梁萌 王新芳 王瑞 祝晓蕊
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE) 荧光标记 标记浓度 标记时间 孵育温度 原生质体再生
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 302-310
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.160032

摘要

为了更准确快捷地评价利用酶解法酶解捕食性真菌Duddingtoniaflagrans菌丝产生的原生质体数量及菌丝细胞壁降解情况,采用活体荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE),对该捕食性真菌菌丝酶解后产生的原生质体进行荧光标记,分别考察了标记浓度、标记时间、孵育温度对原生质体标记效果的影响,并观察CFSE标记后的原生质体再生情况.结果表明CFSE终浓度为10μmol/L,标记时间为15min,孵育温度为36℃,是CFSE标记捕食性真菌原生质体的理想条件,该试验同时表明CFSE不影响原生质体的再生率.CFSE作为一种活细胞示踪荧光探针,可以快速高效地标记捕食性真菌原生质体,该方法为捕食性真菌原生质体制备质量的快速评价提供了新的思路.