表达兔瘟病毒VP60基因的重组病毒BHV-1的构建与鉴定

• 作者: 原冬伟 曲连东 薛飞 郭东华 鲁文赓 黄艳秋
• 来源期刊: 免疫学研究
• 学科: 农学
• 关键词: 兔瘟病毒 VP60基因 牛疱疹病毒1型 蓝白斑筛选
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 页码范围: 11-18
• 页数: 8页
• 分类号: S852

摘要

为了构建表达兔瘟病毒VP60基因的牛疱疹病毒I型,首先构建含有兔瘟病毒VP60基因和CMV启动子的转移载体,然后将构建移载体与gE基因缺失的牛疱疹病毒I型基因组共转染牛肺细胞后收获增殖的病毒。通过蓝白斑筛选不含有LacZ基因的白色病毒蚀斑,反复纯化获得重组病毒BHV-1-VP60。PCR方法验证VP60基因的成功插入,间接免疫荧光试验和Western blot,结果证明了BHV-1-VP60中的VP60基因在易感细胞中获得了表达。本研究成功地构建了兔瘟病毒VP60基因的重组病毒BHV-1-VP60,为研制新型兔瘟活载体疫苗奠定了基础。