移植人羊膜间充质干细胞促进脑出血大鼠神经功能恢复

• 作者: 周洪龙 张鸿日 徐如祥 闫中杰
• 来源期刊: 中华神经创伤外科电子杂志
• 关键词: 间充质干细胞 羊膜 脑出血 移植 神经功能恢复
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 33-39
• 页数: 7页
• 字数: 3886字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-9141.2017.01.009

摘要

目的：研究移植人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）是否能促进脑出血大鼠神经功能恢复，探索其可能作用机制。方法138只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为人皮肤成纤维细胞（Fibroblasts）治疗组（46只）、磷酸盐缓冲液（PBS）治疗组（46只）和hAMSCs治疗组（46只）。脑出血模型采用颅内注射Ⅶ型胶原酶制作，24 h后颅内移植hAMSCs、Fibroblasts和PBS。应用流式细胞仪检测hAMSCs表面抗原。免疫荧光检测细胞分化、血管再生和神经再生。酶联免疫吸附剂测定试剂盒检测脑源性神经营养因子（BDNF）和血管内皮生长因子（VEGF），改良神经功能评分（mNSS）检测行为学。结果分离培养的hAMSCs呈现成纤维细胞样细胞形态，表达CD29、CD44、CD90、CD105和CD166，不表达CD19、CD34和CD45。 mNSS评分显示，颅内出血（ICH）7 d后，hAMSCs组评分明显高于Fibroblasts治疗组和PBS治疗组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 ICH后14 d， hAMSCs组BrdU+细胞数目（55.33±6.59）高于Fibroblasts组（26.66±3.58）和PBS组（25.50±2.90），差异具有统计学意义（P＜0.05）。 hAMSCs组Brdu+/DCX+细胞数目（30.66±3.65）高于Fibroblasts组（11.83±2.70）和PBS组（10.00±2.54），差异具有统计学意义（P＜0.05）。hAMSCs组血管性血友病因子+血管数目[（67.50±6.76）/mm2]高于Fibroblasts组[（31.66±6.33）/mm2]和PBS组[（28.83±5.58）/mm2]，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 ICH后7 d和14 d，hAMSCs组BDNF表达水平[（63.16±2.31） pg/mg，（38.57±3.69） pg/mg]高于Fibroblasts组[（46.18±2.45） pg/mg，（20.52±2.81） pg/mg]和PBS组[（43.18±2.30） pg/mg，（18.28±2.39） pg/mg]，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 ICH后7、14、21 d，hAMSCs组VEGF表达水平[（43.32±3.65） pg/mg，（30.90±2.62） pg/mg，（24.89±2.85） pg/mg]高于Fibroblasts组[（22.88±2.62） pg/mg，（15.41±2.40） pg/mg，（10.57±1.54） pg/mg]和 PBS 组[（20.81±3.06） pg/mg，（14.44±2.32） pg/mg，（11.42±1.48） pg/mg]，差异具有统计学意义（P＜0.05）。移植的hAMSCs在颅内存活最少27 d，不表达神经元标志物β-tubulinⅢ和星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白。结论移植hAMSCs能促进脑出血大鼠神经功能恢复，其作用机制可能是通过增加神经营养因子表达，促进血管再生和神经再生。因此hAMSCs是治疗脑出血的理想干细胞。