斑点叉尾鮰LEAP2成熟肽在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性

• 作者: 孙立人 陶妍 高北
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斑点叉尾鮰 LEAP2成熟肽 毕赤酵母 重组DNA表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 23-30
• 分类号: S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.12024/jsou.20160401759

摘要

LEAP2 (Liver expressed antimicrobial peptide-2)抗菌肽是一类主要在动物肝脏中表达的小分子肽,它们在动物的免疫系统中发挥了重要作用.斑点叉尾鮰(Ictalurus puactatus)LEAP2的一级结构由信号肽和原前体肽组成;原前体肽由66个氨基酸残基组成,近羧基端的41个残基组成了其成熟肽区域(mLEAP2),该区域决定了LEAP2的生物学活性.本文以斑点叉尾鮰mLEAP2为研究对象,通过建立毕赤酵母表达系统,实现了mLEAP2在毕赤酵母中的重组DNA表达,优化的表达条件为:29℃、pH 6、250 r/min、0.5％甲醇、120 h.Tricine-SDS-PAGE分析表明:表达产物经固化金属离子亲和层析(IMAC)纯化后,获得了高纯度的目的蛋白.经Folin-酚法测定,纯化产物的浓度为0.22 mg/mL,推算至表达量为2.2 mg/L.进一步通过MALDI-TOF/TOF质谱分析对纯化产物的结构进行鉴定,结果证明:获得的纯化产物为预期的重组体mLEAP2(mLEAP2).此外,抑菌实验结果显示rmLEAP2具有明显的抑制枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶妍	上海海洋大学食品学院	34	379	6.0	19.0
3	高北	上海海洋大学食品学院	3	8	2.0	2.0
7	孙立人	上海海洋大学食品学院	1	4	1.0	1.0