副猪嗜血杆菌菌体蛋白的提取及蛋白质双向电泳方法建立

• 作者: 冯世文 彭昊 李军 杨威 潘艳 禤雄标 许力干 谢宇舟 陈泽祥
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 双向电泳 菌体蛋白 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 46-49
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文

摘要

为了建立副猪嗜血杆菌菌体蛋白的双向电泳方法,获得背景清晰、蛋白分辨率高的双向电泳图,对细菌裂解方法、蛋白上样量、IPG胶条选择等关键步骤进行优化.结果显示,采用超声(9.9 s/停顿9.9s,200 W)冰浴破碎细菌,5 min后,裂解液溶解沉淀,4℃过夜裂解提取菌体蛋白,以0.6 mg菌体蛋白上在pH值3～10非线性IPG胶条上进行电泳,最后考马斯亮蓝G250染色,获得的蛋白质点清晰,效果最好,随机挑取14个蛋白点进行质谱鉴定,证实均为副猪嗜血杆菌菌体蛋白.