miR-718和EGR3参与调控肝癌细胞系的恶性表型的研究

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-718 小非编码RNA 早期生长反应蛋白3 肝癌 表型
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 27-36
• 页数: 10页
• 分类号: R735.2
• 语种: 英文
• DOI: 10.1631/jzus.B1600205

摘要

目的：研究miR-718和早期生长反应蛋白3（EGR3）在肝癌细胞系HepG2及SMMC-7721中对细胞恶性行为的作用。创新点：首次在肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721中发现miR-718作为抑癌基因及 EGR3作为促癌基因起到调控肿瘤恶性行为的作用。方法：采用聚合酶链反应（PCR）方法构建miR-718和EGR3的过表达及敲降质粒，并采用实时定量PCR （ qRT-PCR ）方法验证质粒有效性；采用MTT 法和克隆形成实验检测肝癌细胞系 HepG2和SMMC-7721的生长增殖能力；采用Transwell迁移侵袭实验检测肝癌细胞系 HepG2和SMMC-7721的迁移和侵袭能力；采用增强型绿色荧光蛋白（ EGFP ）荧光报告载体实验验证miR-718的靶基因；采用qRT-PCR和蛋白质印迹（Western blot）检测相关基因表达水平的变化。结论：miR-718在肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721中起到抑癌基因的作用；EGR3在肝癌细胞系 HepG2和SMMC-7721中起到促癌基因的作用；miR-718是通过靶定EGR3 mRNA 3' UTR下调EGR3的表达起到抑癌基因的作用。