小鼠雌性生殖干细胞体内分化鉴定方法

• 作者: 卢智勇 吴梦 张金金 熊家强 王世宣
• 来源期刊: 生殖医学杂志
• 关键词: 雌性生殖干细胞 分化 鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1238-1242
• 页数: 5页
• 字数: 3710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3845.2017.12.015

摘要

目的 建立一种小鼠卵巢雌性生殖干细胞(FGSCs)体内分化鉴定方法. 方法 从6周龄C57BL/6小鼠卵巢利用Fragilis抗体基于免疫磁珠分选(MACS)分离FGSCs细胞,并置于STO饲养层细胞上扩增培养,采用RT-PCR法检测生殖干性基因包括Fragilis、MVH、Prdm1和Tert,细胞免疫荧光法检测Fragilis和MVH蛋白表达,利用绿色荧光蛋白(GFP)慢病毒载体荧光标记FGSCs后将其植入受体鼠卵巢,在体内环境下促其分化发育为卵母细胞,至少12d后取卵巢置于载玻片上并压上盖玻片,直接置于荧光显微镜下观察. 结果 RT PCR结果显示FGSCs生殖干性基因包括Fragilis、MVH、Prdm1和Tert为阳性表达,而卵母细胞特异表达基因中Nobox为阴性,GDF9和ZP3为弱阳性;细胞免疫荧光结果显示FGSCs的MVH和Fragilis蛋白表达阳性,而且呈明显的膜表达.GFP-FGSCs植入6周龄雌性C57BL/6的卵巢中,至少12d以后将卵巢取出,压片后置于荧光显微镜下观测,结果显示有荧光阳性的卵母细胞. 结论 该鉴定方法简单直观,可作为FGSCs体内分化鉴定的可选方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王世宣	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇科	131	686	14.0	19.0
2	张金金	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇科	9	29	3.0	5.0
3	吴梦	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇科	5	5	2.0	2.0
4	熊家强	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇科	4	12	2.0	3.0