1株猪传染性胃肠炎病毒的分离鉴定及其生物学特性研究

• 作者: 唐青海 姚伦广 李晓楠 李羽 杨海 王瑾 阚云超
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 分离培养 免疫过氧化物酶单层细胞染色法 S1基因
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 131-136
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.08.025

摘要

采集1例疑似感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)仔猪的粪便,运用RT-PCR方法和血清学方法对病料进行TGEV检测,并应用猪睾丸细胞(ST)进行病毒分离培养,分别采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和RT-PCR方法检测病毒在ST细胞中的增殖动态,应用RT-PCR方法扩增分离TGEV S1基因,经序列测定后,采用DNAStar 7.0和Mega 5.0软件对TGEV进行生物信息学分析.结果表明,病料接种到ST细胞培养后,出现明显细胞病变效应(CPE);RT-PCR检测结果显示,TGEV核酸阳性;血清学鉴定TGEV抗原阳性.将分离毒株命名为TGEV-NY.感染12h后,IPMA检测结果阳性,且可从细胞培养上清中检出TGEV核酸.序列测定分析表明,分离毒株S1基因开放阅读框(ORF)为2 220 bp,编码740个氨基酸.进化分析显示,分离毒株与我国2006年分离的SC-Y毒株亲缘关系最近,分离毒株属于基因Ⅰ群.