猪链球菌2型强毒株sly基因敲除株构建及生物学特征分析

• 作者: 孙雯 郑峰
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪链球菌2型 溶血素 基因敲除 突变株 野生株 生长曲线 溶血
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 45-52
• 页数: 8页
• 分类号: Q984
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.01.0008

摘要

[目的]构建猪链球菌2型05ZYH33溶血素sly基因敲除突变株,比较突变株与野生株生物学特征.[方法]分别克隆sly上游序列L、下游序列R和壮观霉素抗性基因spc',构建基因敲除质粒pUC18-LSR,并电转化入05ZYH33感受态细菌.用多重PCR、RT-PCR及Southern杂交对sly基因敲除突变株进行鉴定.比较突变株与野生株的生长速率和溶血现象.[结果]多重PCR和RT-PCR分别显示,野生株DNA和cDNA都能扩增出579 bp的sly内部片段,而突变株DNA和cDNA都未能扩增出此片段.Southern杂交显示,突变株中未见sly探针杂交条带.突变株生长速率较野毒株迟缓,溶血能力减弱,但依然存在.[结论]建立了高效稳定的电转化方法,成功构建出溶血能力减弱的双交换同源重组sly基因敲除突变株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙雯		6	17	3.0	4.0
2	郑峰		1	0	0.0	0.0