应用荧光染色剂Fluorescent Brightener 28和Propidium Iodide染色识别家蚕微孢子虫

• 作者: 唐旭东 彭祥然 徐莉 戴卫江 李孝良 沈中元 陈功 马琳
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕微孢子虫 检疫方法 荧光增白剂28 碘化丙啶 荧光染色
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 62-67
• 页数: 6页
• 分类号: Q959.115+.92
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2017.01.009

摘要

家蚕微粒子病被列为蚕种生产的唯一法定检疫对象,母蛾镜检家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)是主要的检疫方法,但其准确性受到多种因素影响.为探究应用荧光增白剂28(Fluorescent Brightener 28,FB28)和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染色识别Nb孢子的可行性,以感染Nb的家蚕幼虫中肠、蚕卵、母蛾、蚁蚕为材料,联合应用以上2种荧光染色剂进行Nb孢子检测效果试验.在荧光显微镜下可见成熟的Nb孢子被FB28染成蓝色且细胞核被PI染成红色,而未成熟的孢子只能被PI染色.采用2种荧光染色剂染色,在被感染的幼虫中肠、蚕卵、母蛾、蚁蚕中都能够检测到Nb孢子,并且带毒母蛾研磨液样品稀释1 000倍依然可以检测到Nb孢子.幼虫中肠感染后1～2d很难观察到Nb孢子,感染后3d可以观察到局部存在少量未成熟的Nb,感染后4d开始局部出现成熟的Nb,至感染后5～6d可见组织中大面积分布有成熟孢子和未成熟孢子.荧光显微镜下观察被染色的Nb孢子的细胞核明显小于幼虫中肠细胞核,且亮度明显较强,卵壳、母蛾、蚁蚕表面的几丁质碎片形状与Nb孢子明显不同,并且不能被PI染色.试验结果表明,该染色检测方法可以排除蚕体组织细胞、几丁质碎片的干扰,提高对Nb检测的准确度,并且在Nb浓度较低的情况下,可以提高检测的灵敏度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈中元		17	5	1.0	2.0
2	唐旭东		18	8	2.0	2.0
3	戴卫江		4	0	0.0	0.0
4	李孝良		6	0	0.0	0.0
5	彭祥然		6	0	0.0	0.0
6	徐莉		11	1	1.0	1.0
7	陈功		4	0	0.0	0.0
8	马琳		16	35	3.0	5.0