西方蜜蜂RBP1基因的克隆及mRNA表达分析

• 作者: 曾志将 李淑云 王子龙 胡弯弯 颜伟玉
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 西方蜜蜂 基因克隆 表达分析 性别决定 选择性剪切
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1403-1410
• 页数: 8页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2017.12.006

摘要

[目的]RBP1是一种参与黑腹果蝇Drosophila melanogaster性别决定基因doublesex(dsx)pre-mRNA选择性剪接的重要剪接因子.本研究旨在克隆RBP1基因在西方蜜蜂Apis mellifera中的同源基因AmRBP1,分析其结构域及其在西方蜜蜂性别决定初期胚胎和幼虫不同发育阶段中的表达模式,以期为研究该基因是否参与蜜蜂性别决定奠定基础.[方法]基于NCBI中提交的西方蜜蜂基因数据库和转录组数据库,利用黑腹果蝇rbp1对数据库进行同源检索获得RBP1的转录组序列,并设计引物进行PCR扩增克隆AmRBP1基因,利用生物信息学软件对其进行核酸及氨基酸序列分析.采用半定量RT-PCR技术分析该基因在西方蜜蜂胚胎及幼虫期的表达模式.[结果]由序列比对分析可知,西方蜜蜂AmRBP1基因的pre-mRNA含有3种不同的选择性剪切形式.通过设计不同的引物,克隆得到3种成熟的mRNA序列,分别命名为AmRBP1-R1(GenBank登录号:KY404154)、AmRBP1-R2(GenBank登录号:KY404155)和AmRBP1-R3(GenBank登录号:KY404156);mRNA长度分别为696,790和771 nt,编码的蛋白大小分别为130,166和162 aa;结构域分析发现AmRBP1的3种选择性剪切形式具有相同的结构域,氨基端含有一个RRM结构域,羧基端含有一个RS结构域.同源性分析表明,西方蜜蜂AmRBP1与丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis、红火蚁Solenopsis invicta、埃及伊蚊Aedes aegypti、黑腹果蝇D.melanogaster、家蚕Bombyx mori、家蝇Musca domestica和中华按蚊Anopheles sinensis RBP1蛋白氨基酸序列一致性分别为96.97％,94.20％,84.85％,81.48％,80.28％,78.15％和69.23％.半定量RT-PCR结果表明,AmRBP1基因的3种剪切形式(AmRBP1-R1-3)在西方蜜蜂胚胎和幼虫各时期均有表达,无雌特异性或雄特异性表达的剪切形式.[结论]西方蜜蜂AmRBP1可能是一种SR家族剪切因子,其有可能参与调控基因表达的特定剪切,但其是否参与doublesex(dsx)基因pre-mRNA的性别特异性剪切需要进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾志将	江西农业大学蜜蜂研究所	238	1129	15.0	18.0
2	颜伟玉	江西农业大学蜜蜂研究所	135	689	13.0	16.0
3	王子龙	江西农业大学蜜蜂研究所	39	159	7.0	10.0
4	李淑云	江西农业大学蜜蜂研究所	7	15	2.0	3.0
6	胡弯弯	江西农业大学蜜蜂研究所	2	0	0.0	0.0