小家鼠螺杆菌TaqMan-qPCR检测方法的建立

• 作者: 丛锋 伍妙梨 朱余军 王静 袁文 郭鹏举 陈梅丽 饶丹 黄韧
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 农学
• 关键词: 小家鼠螺杆菌 TaqMan-qPCR
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 378-382
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3|Q95-33
• 字数: 3134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.05.007

摘要

目的 建立敏感性高、特异好的小家鼠螺杆菌(Helicobacter muridarum) TaqMan-qPCR检测方法.方法 选择小家鼠螺杆菌保守基因GyrB设计特异性引物进行PCR扩增,并构建质粒标准品GyrB-19T.通过反应体系及条件的优化,建立小家鼠螺杆菌TaqMan-qPCR检测方法,并对GyrB-19T标准品进行定性及定量分析,评估该方法的灵敏度、特异性及重复性.结果 所建立的qPCR检测方法,质粒标准品浓度在2×102～2×108拷贝/μL范围内表现出较好的线性相关性,所得标准曲线的斜率为-3.57,相关系数为0.996,检测灵敏度达到200拷贝/μL.结论 所建立的小家鼠螺杆菌TaqMan-qPCR方法具有特异性好、敏感性高、稳定性强等特点,适用于小家鼠螺杆菌的定量及定性分析.