枯草芽孢杆菌头孢菌素C脱乙酰基酯酶在大肠杆菌中的诱导及组成型表达

• 作者: 朱颖 杨胜利 苏二正 马晓强 魏东芝
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 工学
• 关键词: 头孢菌素C脱乙酰基酯酶 诱导型表达 组成型表达 3′-脱乙酰基-7-氨基头孢烷酸
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 生物制造
• 页码范围: 21-29
• 页数: 9页
• 分类号: TQ925
• 字数: 8166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2017.02.004

摘要

本研究构建了8种诱导型质粒和16种组成型质粒,试图实现枯草芽孢杆菌头孢菌素C脱乙酰基酯酶(CAH)基因在大肠杆菌中的高效异源表达.经过筛选,最终选择带有pUC19上的起始位点、SIL3基因、trp启动子以及间隔序列为B1的组成型表达质粒pB1-SIL3-K为最佳表达质粒.将PB1-SIL3-K转入Escherichia coli DH5α,重组菌在37 ℃发酵培养24 h,其OD值达到5.4,酶活达到了138.61 U/mL.进一步通过培养基组成、培养条件、放大过程等优化,在7 L发酵罐上,CAH最高酶活达到1 340 U/mL,为目前国内外文献报道最高水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏东芝	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	158	1415	22.0	29.0
2	苏二正	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	25	65	5.0	7.0
6	杨胜利	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	2	0	0.0	0.0
7	朱颖	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	1	0	0.0	0.0
8	马晓强	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	1	0	0.0	0.0