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摘要:
[目的]海藻糖合成酶(trealose-6-phosphate synthase,TPS)是海藻糖合成过程中的关键酶之一.本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖合成酶基因,分析其对不同温度胁迫的响应,以期进一步揭示沙葱萤叶甲耐温性的分子调控机制.[方法]通过RACE技术克隆沙葱萤叶甲TPS基因的全长cDNA序列,并对该基因进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法检测TPS基因在不同温度下沙葱萤叶甲2龄幼虫中的表达量变化.[结果]克隆获得沙葱萤叶甲TPS基因,将其命名为GdTPS(GenBank登录号:KY460114),该基因全长2 706 bp,开放阅读框(ORF)长2 496 bp,编码831个氨基酸;蛋白预测分子量为94.05 kD,等电点为6.82,无信号肽和跨膜结构,包含3个N-糖基化位点.GdTPS有两个保守功能区,与其他昆虫TPS具有较高的同源性,其中与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata TPS亲缘关系最近,氨基酸序列一致性为88%.实时荧光定量PCR结果表明,温度低于25℃(对照)时,GdTPS表达量随着温度下降而上升,-10℃时达到最高值;高于25℃时,GdTPS表达量随着温度上升而上升,40℃时达到最高值.[结论]沙葱萤叶甲幼虫通过上调GdTPS的表达来应对高温和低温胁迫,该结果为揭示TPS在昆虫应对温度胁迫过程中作用的分子机制提供了基础.
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文献信息
篇名 沙葱萤叶甲海藻糖合成酶基因GdTPS的克隆及对温度胁迫的响应
来源期刊 昆虫学报 学科 生物学
关键词 沙葱萤叶甲 海藻糖合成酶 基因克隆 温度胁迫 实时荧光定量PCR
年,卷(期) 2017,(12) 所属期刊栏目 生理与生化
研究方向 页码范围 1384-1393
页数 10页 分类号 Q966
字数 语种 中文
DOI 10.16380/j.kcxb.2017.12.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 庞保平 内蒙古农业大学草原昆虫研究中心 104 1186 20.0 27.0
2 周晓榕 内蒙古农业大学草原昆虫研究中心 59 674 16.0 23.0
3 谭瑶 内蒙古农业大学草原昆虫研究中心 13 35 4.0 5.0
4 邢莉 4 4 2.0 2.0
5 路标 内蒙古农业大学草原昆虫研究中心 2 2 1.0 1.0
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沙葱萤叶甲
海藻糖合成酶
基因克隆
温度胁迫
实时荧光定量PCR
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昆虫学报
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0454-6296
11-1832/Q
16开
北京市朝阳区北辰西路1号院5号中国科学院动物研究所
1950
chi
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