干扰TIP47基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂滴形成及相关基因表达的影响

• 作者: 史怀平 张倡珲 石恒波 罗军 许会芬 郝娟
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 奶山羊 47kD尾部相互作用蛋白基因(TIP47) RNA干扰 乳腺上皮细胞
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 250-257
• 页数: 8页
• 分类号: S826.9+4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2017.02.009

摘要

47kD尾部相互作用蛋白(tail-interacting protein 47,TIP47)在脂滴形成与代谢过程中具有重要调控作用,研究其在乳脂滴形成过程中的作用对调控羊(Capra hircus)乳品质具有重要意义.本研究采用BLOCK-iT小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)腺病毒(Adenovirus)干扰系统,根据奶山羊TIP47基因序列,在线设计并合成干扰shRNA.将有效shRNA序列构建载体,并在293A细胞中包装腺病毒.利用腺病毒载体干扰乳腺上皮细胞TIP47基因表达后,检测胞内脂肪酸代谢基因及脂滴的变化.结果表明,筛选到有效shRNA序列并获得高滴度TIP47基因的干扰腺病毒Ad-shRNA-888.Ad-shRNA-888感染山羊原代乳腺上皮细胞后发现,TIP47 mRNA表达量下调61％(P＜0.01).干扰TIP47基因的表达后,甘油三酯水解酶基因(adipose triglyceride lipase,ATGL)下调了15％,而脂肪酸合酶基因(fatty acid synthase,FASN)和激素敏感脂酶基因(hormone-sensitive lipase,HSL)分别上调1.77(P＜0.05)和2.8(P＜0.01)倍,硬脂酰辅酶A去饱和酶基因(stearoyl-CoA desaturase,SCD)表达水平变化不显著.油红O结果显示干扰TIP47基因可以降低细胞脂滴(lipid droplets,LD)的形成.本研究对TIP47基因进行干扰,发现其在奶山羊乳腺细胞脂滴形成过程中有重要调控作用,为进一步研究TIP47基因对脂滴代谢的影响提供一定的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石恒波	浙江理工大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0