FTL-EGFP融合基因真核表达载体的构建及其表达

• 作者: 何淑芬 刘思颖 徐慕陶 樊玉梅 段相林 苗峻华 谭克
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 铁蛋白轻链 绿色荧光蛋白 分子克隆 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 108-111,160
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.02.0018

摘要

[目的]构建小鼠铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)真核表达载体并检测其表达.[方法]利用PCR扩增技术得到小鼠560 bp的FTL基因编码序列,将此序列插入到含有增强型绿色荧光基因EGFP的真核表达载体PEGFP/N1多克隆位点区域中的限制内切酶HindⅢ和BamH Ⅰ之间,得到真核表达载体mFTL-PEGFP/N1.经酶切和测序鉴定后,将构建成功的mFTL-PEGFP/N1及其对照空载体PEGFP/N1分别转染到小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞中,提取蛋白后利用免疫印迹技术检测细胞中带有PEGFP标签的FTL蛋白的表达.[结果]新构建的mFTL-PEGFP/N1重组质粒经酶切鉴定得到预期片段,进一步的测序结果显示所构建的重组质粒中插入的小鼠FTL基因的cDNA序列正确.[结论]利用分子克隆技术获得了带有绿色荧光蛋白标签的小鼠铁蛋白轻链真核表达载体mFTL-PEGFP/N1,并在细胞中表达良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段相林		121	1113	18.0	26.0
2	樊玉梅		14	42	4.0	6.0
3	刘思颖		2	0	0.0	0.0
4	谭克		2	0	0.0	0.0
5	徐慕陶		1	0	0.0	0.0
6	何淑芬		1	0	0.0	0.0
7	苗峻华		1	0	0.0	0.0