TGF-β1诱导上皮间质转化过程中线粒体合成与功能的改变

• 作者: 刘瑞 刘颖 周庆彪 孔德钦 张伟 张佳欣 海春旭
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 上皮间质转化 活性氧 线粒体 转化生长因子-β1
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 411-417
• 页数: 7页
• 分类号: R73-37
• 字数: 5869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2017.06.002

摘要

目的:研究在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导上皮间质转化过程中线粒体合成与功能的改变.方法:体外培养人肺癌A549细胞,经不同浓度(0、2.5、5、10、20、40 ng/mL)TGF-β1处理24和48 h后观察其形态变化;采用CCK-8法检测经TGF-β1处理48 h后A549细胞的活力;流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧(ROS)、线粒体活性氧及线粒体膜电位的变化;酶标仪检测ATP含量;Western blot分别检测细胞中上皮间质转化(EMT)相关标记物(E-cadherin和α-SMA)及线粒体合成相关蛋白(NRF-1及mt-TFA)的表达水平.结果:与对照组相比,随着TGF-β1浓度增加,A549细胞活力逐步上升,呈剂量-效应关系(r=0.941,P＜0.05);5～20 ng/mLTGF-β1处理组凋亡率明显升高(P均＜0.05);不同浓度TGF-β1处理A549细胞48 h后大部分细胞呈现明显的间质细胞形态,出现上皮间质转化;Western blot结果显示,与对照组比较,经TGF-β1处理48 h后上皮标记物E-cadherin蛋白表达水平逐渐降低(P＜0.05),间质标记物cα-SMA表达水平逐渐升高(P＜0.05);流式细胞术检测结果显示,5～20 ng/mL TGF-β1处理后细胞内ROS含量上升(P＜0.05),线粒体活性氧上升(P＜0.05),线粒体膜电位荧光强度下降(P＜0.05),ATP含量降低(P＜0.05),线粒体合成相关蛋白NRF-1和mt-TFA表达水平均下调(P均＜0.05).结论:TGF-β1诱导细胞发生上皮间质转化过程中线粒体的合成与功能受到影响,并由此促进了EMT的发生.