拟南芥蛋白质激酶CARK7与ABA受体RCAR12相互作用的研究

• 作者: 刘志斌 李小意 李旭锋 李晶祥 杨毅 陈静波 黄琪
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白质激酶 相互作用 CARK7 RCAR12
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 1077-1082
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3709字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2017.05.032

摘要

脱落酸(ABA)受体RCARs在ABA信号传导过程中起关键作用,研究ABA受体的相互作用蛋白质对进一步了解植物抗逆的分子机制有重要的意义.本研究通过酵母双杂交发现CARK7与ABA受体RCAR12共转化酵母能在营养缺陷型平板SD/-Trp-Leu-Ade上生长.将CARK7与RCAR12分别克隆到原核表达载体pET-28a(+)和pGEX-6p-1中,构建融合蛋白表达载体,并进行原核表达和亲和纯化.纯化所得蛋白进行GST-pull down实验,结果表明RCAR12能够把CARK7蛋白拉下来.上述结果说明CARK7与RCAR12在体外存在相互作用.进一步通过双分子荧光互补实验发现CARK7与RCAR12在烟草叶片表皮细胞中能产生荧光信号,说明两者在体内同样具有明显的相互作用.