miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞“干性”维持中的作用

• 作者: 俆永素 朱蓉 李伶俐 赵逵 鲁生念
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 微小RNA-302b 干性 Ascl2 Lgr5
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 515-519
• 页数: 5页
• 分类号: R735.3+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2017.17.0420

摘要

目的 探讨miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞“干性”维持中的作用及可能机制.方法 体外培养人结肠癌细胞株HT-29,转染miRNA-302b模拟物(miRNA-302b mimics),同时以未转染组(control)和阴性模拟物转染组(negative control-mimics,NC-mimics)作为对照,采用实时定量反转录聚合酶链反应法(real-time PCR)检测HT-29细胞结肠癌“干性”标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2mRNA的表达情况;采用蛋白印迹法(Western blot)检测以上“干性”标志蛋白表达的变化;采用克隆形成实验及干细胞成球实验分别观察HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力的变化.结果 Realtime PCR结果示,miR-302b mimics转染HT-29细胞48 h,“干性”标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2rmRNA表达一致性上调(P＜0.05);Western blot结果示Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2蛋白表达也上调(P＜0.05).克隆形成实验及干细胞成球实验结果示,miR-302b mimics转染后HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力增强,与control组和NC-mimics组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 miRNA-302b可通过上调“干性”标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2的表达促进HT-29细胞的克隆形成和细胞球形成能力,从而在结肠癌“干性”维持中发挥重要作用.