可溶性白细胞分化抗原40配体原核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 乔录新 刘东杰 吴刚 吴涛 张志强 纪乐 陈德喜
• 来源期刊: 转化医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 可溶性白细胞分化抗原40配体 原核表达载体 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: ?分子标志物?
• 页码范围: 12-15
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3097.2017.01.003

摘要

目的：构建原核表达载体pGEX-4T含人可溶性白细胞分化抗原40配体( soluble cluster of di-fferentiation antigen 40 ligand,sCD40L)重组质粒。方法通过反转录-聚合酶链反应扩增,获得人sCD40L的基因片段；将其连接入T载体,用5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷与异丙基-β-D-硫代半乳糖苷筛选阳性克隆,鉴定正确后经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,再与pGEX-4T原核表达载体连接,最后经酶切及测序鉴定。结果以L02细胞的互补DNA为模板,扩增出474 bp的目的基因；将目的片段与T载体连接并进行蓝白筛选得到阳性克隆；构建pGEX-4T-sCD40L重组质粒,经转化和筛选获得重组菌,经酶切、基因测序证实序列正确。结论成功构建pGEX-4T-sCD40L原核表达载体,为进一步探讨sCD40L在肝癌诊断中的作用奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈德喜		38	132	8.0	10.0
2	乔录新		10	26	2.0	4.0
3	张志强	包头医学院生物化学与分子生物学教研室	5	9	2.0	3.0
4	吴涛	包头医学院生物化学与分子生物学教研室	4	4	1.0	2.0
5	刘东杰	包头医学院生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0
6	纪乐	包头医学院生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0