乳鼠心肌细胞的原代培养方法改良

• 作者: 刘博 刘小玲 刘小雷 吕莹雪 张媛彦 潘桂兰 肖云峰
• 来源期刊: 中南药学
• 学科: 医学
• 关键词: 乳鼠 心肌细胞 原代培养 方法改良
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.7539/j.issn.1672-2981.2017.01.005

摘要

目的 探讨乳鼠原代心肌细胞分离、培养和纯化的方法,得到存活率高、搏动频率强、纯度高的心肌细胞.方法 采用0.08％胰蛋白酶及0.05％Ⅱ型胶原酶消化心脏组织,差速贴壁60 min,加入终浓度为0.1 mmol·L-1的5-Brdu纯化心肌细胞.倒置显微镜下观察不同时间心肌细胞形态学变化;记录心肌细胞搏动频率;台盼蓝染色,测定心肌细胞存活率.结果 心肌细胞生长状态良好,4h开始贴壁,48～72h基本完全贴壁,形成放射状排列的细胞簇,同步搏动;5～9 d心肌细胞搏动频率在80～110次·min-1,活力好且稳定;采用台盼蓝染色法测得心肌细胞平均存活率为97.7％.结论 此方法可得到存活率高、搏动频率强、纯度较高的心肌细胞,可为科研研究提供良好的实验模型.