免疫球蛋白A在人肾小球系膜细胞中的合成与分泌

• 作者: 刘洋 景子洋 梁耀先 王悦 邓会 邱晓彦 阿拉塔 马骏凡
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 人肾小球系膜细胞 免疫球蛋白A 蛋白质谱 DNA测序
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 948-953
• 页数: 6页
• 分类号: R692.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2017.06.003

摘要

目的:探讨人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)中是否表达免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA).方法:培养人HMCs细胞系,以免疫荧光染色检测Ig α、Ig κ、Igλ在系膜细胞中的表达;以反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和DNA测序检测HMCs中Ig α、Ig κ、Igλ恒定区转录本表达;以Western blot方法检测细胞裂解液及培养上清液中Ig α、Ig κ、Igλ蛋白水平表达;以jacalin为配体的亲和层析纯化上清液蛋白质,以蛋白质谱检测纯化的蛋白氨基酸序列.结果:免疫荧光染色检测到HMCs细胞浆Ig α、Ig κ、Igλ的阳性表达;RT-PCR检测到细胞内Ig α1、Ig α2重链、Ig κ轻链、Igλ轻链恒定区转录本表达,且其核苷酸序列与美国国立生物技术信息中心(National Center of Biotechnology Information,NCBI)数据库相应的mRNA序列比对,同源性分别达到99％、97％、98％和97％;Western blot检测到细胞内Ig α1、Ig α2和Igλ蛋白水平的表达,Ig κ目前检测为阴性;细胞上清液中可见完整IgA分子表达;以jacallin为配体亲和层析纯化的培养上清液中的IgA,蛋白质谱测序所得的氨基酸片段序列与NCBI数据库比对,显示HMCs分泌的蛋白质与B细胞表达的Ig α1恒定区52～104之间53个氨基酸、154 ～ 221之间68个氨基酸、以及276～327之间52个氨基酸的序列完全相同,与Ig α2重链恒定区52 ～ 113之间62个氨基酸、151～204之间54个氨基酸、以及251 ～ 314之间64个氨基酸的序列完全相同,提示系膜细胞可以将合成的IgA分泌到胞外.结论:HMCs可能合成并分泌IgA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王悦	北京大学第三医院肾内科	137	1154	17.0	30.0
2	阿拉塔	北京大学第三医院肾内科	19	146	8.0	11.0
3	刘洋	北京大学基础医学院免疫学系	99	1142	16.0	32.0
4	邱晓彦	北京大学基础医学院免疫学系	9	86	5.0	9.0
5	梁耀先	北京大学第三医院肾内科	7	10	1.0	3.0
6	景子洋	北京大学第三医院肾内科	2	1	1.0	1.0
7	邓会	北京大学第三医院肾内科	1	1	1.0	1.0
8	马骏凡	北京大学基础医学院免疫学系	1	1	1.0	1.0