5种转基因油菜转化体特异性多重PCR检测方法

• 作者: 修伟明 李刚 杨殿林 赵建宁 鲁军
• 来源期刊: 生物安全学报
• 关键词: 多重PCR 转基因油菜 转化载体特异性
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 244-250
• 页数: 7页
• 字数: 5523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1787.2017.03.011

摘要

[目的]全球转基因植物及其产品的数量和种类越来越多,迫切需要可同时精准高效检测多个转化载体的检测方法.[方法]针对RF1、MS8、Topas19/2、Oxy235和RF3等5个转基因油菜品系的侧翼序列及油菜内源基因cruciferinA(CruA)序列设计多重聚合酶链式反应特异性引物,通过对转基因油菜、转基因大豆、转基因玉米、转基因水稻、转基因棉花等不同作物进行PCR扩增来测试所选择的引物特异性,优化多重PCR反应引物的浓度,用所建立的检测体系对不同混合比例的转基因油菜进行多重PCR扩增来测试所建立的检测方法的灵敏度.[结果]通过测试,仅在含有目标样品中检测出阳性结果,灵敏度达0.05%,表明所建立的6重PCR检测方法可同时精准检测RF1、MS8、Topas19/2、Oxy235和RF3等5种转基因油菜转化载体.[结论]所建立的6重转基因油菜转化体特异性PCR检测方法通量高、特异性好、灵敏度高,符合有关转基因产品检测的要求,可作为转基因油菜检测的有效方法.