摘要:
目的 探讨萝卜硫素(sulforaphane,SF)对小鼠急性放射性肺损伤的防护作用及其机制.方法 40只雌性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为健康对照组、单纯照射组、照射+SF3 mg/kg组、照射+SF 5 mg/kg组、照射+SF 10 mg/kg组,每组8只.以6MVX射线全肺单次12 Gy照射,各给药组自照射前7d开始至照射后7d,隔天腹腔注射不同浓度的SF,健康对照组和单纯照射组注射同等剂量的二甲基亚砜溶剂(DMSO+生理盐水).照后14 d,留取小鼠肺组织标本,HE染色观察病理改变,免疫组织化学法观察NLRP3的定位与表达,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、TGF-β1表达水平,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺组织中NLRP3、IL-1β mRNA的表达,Western blot检测NF-κB p65、NLRP3、IL-1β蛋白表达,凝胶迁移实验(EMSA)检测NF-κB活性.结果 HE染色结果显示,各照射+SF组与单纯照射组比较,肺组织急性炎性反应减轻.肺组织中NLRP3表达下降,照射+SF 10 mg/kg组NLRP3降低显著(F=42.750,P <0.05).支气管肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、TGF-β1水平下降(tIL-6=-62.65 ~-21.00,tTNF-α=-32.18~-16.57,tTGF-β1=-58.22~-46.11,P<0.05).肺组织NLRP3和IL-1β mRNA表达显著下降(tNLRP3=-6.56 ~-5.68,tIL-1β=-29.75 ~-21.20,P<0.05).NF-κB p65、NLRP3、IL-1β蛋白表达下降(tNF-κB p65=-34.00 ~-1.71,tNLRP3=-25.01~-16.91,tIL-1β=-73.70 ~-55.14,P<0.05),其中NF-κB p65、NLRP3相对表达量和SF呈剂量依赖性降低(r=0.945、0.926).EMSA结果显示,NF-κB活性下降,且和SF呈剂量依赖性降低(tNF-κB=-38.68、-614.82、-2 831.40,P<0.05).结论 萝卜硫素可通过降低小鼠肺组织NLRP3表达,有效地降低炎性因子的表达,减轻辐射诱导的炎症反应,对放射性肺损伤具有防护作用.