液滴数字聚合酶链式反应芯片及其在致病菌检测中的应用

• 作者: 刘松生 卞晓军 周洪波 张苑怡 袁浩钧 贾春平 赵建龙 邓雪蕾 郜晚蕾 陈莹莹
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 数字PCR 液滴微流控芯片 致病菌 副溶血性弧菌
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1191-1196
• 页数: 6页
• 分类号: O657|Q523
• 字数: 4600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2017.10.004

摘要

设计与制作了一种基于聚二甲基硅氧烷-玻璃(PDMS-Glass)的多功能集成式液滴数字聚合酶链式反应(ddPCR)芯片,该芯片由产生液滴的PDMS模块和收集液滴的玻璃腔体模块组成.PDMS模块采用双通道的T形结构设计,液滴产生速度快且通量高,在30 min内可生成2×106个直径约为20 μm的微液滴.玻璃腔体模块中存储的液滴在整个实验过程中无需转移,可直接在原位PCR仪上进行扩增,每个液滴均是一个微反应器,经过多次热循环后,液滴仍能保持良好的稳定性.选用副溶血性弧菌(VP)作为食源性致病菌的研究模型,考察了ddPCR芯片对其基因组DNA的绝对定量能力,结果表明,该ddPCR芯片对VP基因组DNA绝对定量的线性范围宽,可跨越5个数量级(101 ～ 106 copies/μL),定量结果与DNA理论参考浓度间有很好的相关性.