shRNA沉默C5aR对LPS诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响

• 作者: 张泽英 张辉 蒋思婧 赵昕 黄爱妮
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: C5a受体 脂多糖 基因沉默 脓毒症
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1327-1332
• 页数: 6页
• 分类号: S852.2
• 字数: 4186字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2017.06.019

摘要

为观察短发夹状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)阻断大鼠C5a受体(C5a receptor,C5aR)基因表达对抑制脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)损伤的影响,将构建好的针对大鼠C5aR基因的shRNA表达质粒转染NRK-52E细胞系,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系.设置空白对照组(NC组)、正常对照组(LPS组)、阴性对照组(LPS+shRNAc组)和处理组(LPS+C5aR-shRNA组).采用荧光定量反转录PCR(RT-PCR)检测细胞中白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor nec-rosis factor-alpha,TNF-α)mRNA的表达,酶联免疫吸附方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中TNF-α、IL-6和髓过氧化物酶(MPO)活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果显示,与正常对照组和阴性对照组相比,试验组中C5aR shRNA能有效抑制炎症因子TNF-α、IL-6的释放,降低细胞凋亡率和细胞中MPO活性(P<0.05).可见,C5aR shRNA能显著抑制由LPS诱导的TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,改善大鼠肾脏功能,对LPS诱导的肾脓毒症损伤有明显保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋思婧	湖北大学生命科学学院	23	149	7.0	11.0
2	赵昕	武昌工学院食品与环境工程学院	13	16	2.0	4.0
3	黄爱妮	武昌工学院食品与环境工程学院	19	37	4.0	5.0
4	张泽英	武昌工学院食品与环境工程学院	7	3	1.0	1.0
8	张辉	武昌工学院食品与环境工程学院	2	5	1.0	2.0