CD20抗体亲和力和免疫原性的改造及表达

• 作者: 张倩倩 李军 李晓旭 纪前前 贾殿隆 郭尚敬
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: CD20分子 抗体 亲和力 免疫原性 非霍奇金淋巴瘤
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 135-141
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.02.0023

摘要

[目的]构建较高亲和力较低免疫原性的CD20抗体.[方法]通过专利分析,进行高亲和力和人源化的设计改造,将抗体的轻链和重链分别克隆到pcDNA3.1/ZEO(+)、pcDNA3.1(+)真核表达载体中,共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1,通过RT-PCR检测mRNA的转录,夹心ELISA检测抗体表达量,流式细胞术检测细胞上清与CD20阳性细胞Raji的结合活性.[结果]得到了高亲和力的人源化CD20抗体的轻链和重链基因片段,并成功地构建了重组表达载体pcDNA3.1/ZEO(+)-CD20L和pcDNA3.1(+)-CD20H,并可在CHO-K1细胞中表达,通过RT-PCR证明基因在CHO细胞中成功表达,ELISA法测得培养上清的含量在0.45～4.72 μg/mL之间,流式检测表明上清中的抗体可与Raji细胞结合.[结论]成功构建并表达筛选了17株单克隆抗体,15号的表达量最大,为4.72 μg/mL,为下一步研究抗体的亲合力、免疫原性以及生物学功能打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭尚敬		74	231	8.0	11.0
2	李军		58	303	7.0	16.0
3	张倩倩		4	17	1.0	4.0
4	纪前前		3	17	1.0	3.0
5	李晓旭		3	3	1.0	1.0
6	贾殿隆		1	0	0.0	0.0