斑节对虾Toll9受体基因免疫功能的研究与表达分析

• 作者: 刘倩 周发林 姜松 杨丽诗 杨其彬 江世贵 邱丽华 黄建华
• 来源期刊: 南方水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 斑节对虾 Toll受体蛋白 细胞免疫模型 TLR信号通路 微生物刺激 先天性免疫
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 63-71
• 页数: 9页
• 分类号: Q172
• 字数: 6610字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.05.009

摘要

Toll受体蛋白(Toll receptors)是一类重要的模式识别受体,在无脊椎动物先天性免疫系统中发挥重要作用.文章对斑节对虾(Penaeus monodon)新型Toll9受体基因(Pm Toll9)进行了研究:以人源胚胎肾细胞(HEK293T)成功构建体外细胞免疫模型,通过免疫印迹方法证实Pm Toll9重组真核蛋白可在HEK293T中成功表达.双荧光素酶报告系统检测发现在200 ng转染浓度处PmToll9对NF-κB报告基因的激活效果显著.qRT-PCR数据证明Pm-Toll9成功激活HEK293T细胞Toll-like receptor(TLR)信号通路,促进通路下游髓样分化因子(MyD88)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素(IL-10)的上调表达,同时酶联免疫吸附测定结果证明Pm Toll9可促进TNF-α蛋白表达水平显著上调.斑节对虾体内细菌刺激实验结果显示无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)可激活PmToll9在肝胰腺、肠、淋巴和鳃中的表达,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)可显著抑制Pm Toll9在肝胰腺中的表达.提示无乳链球菌可通过PmToll9激活Toll信号通路,引起机体免疫防御反应,而哈维氏弧菌对此过程具有一定的抑制作用.