山瑞鳖细菌性败血症病原菌的分离鉴定及其毒力基因检测

• 作者: 梁静真 胡大胜 蒙兰丽 覃志彪 韦慕兰 韩书煜 黄维 黄艳华 黄钧
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山瑞鳖 细菌性败血症 嗜水气单胞菌 毒力基因
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 页码范围: 1443-1454
• 页数: 12页
• 分类号: S941.4
• 字数: 6250字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20160910554

摘要

查明广西南宁、贵港和桂平养殖山瑞鳖细菌性败血症的病原菌及其6种毒力基因的携带情况,为有效防控山瑞鳖细菌性败血症提供参考.本研究以常规方法从患病山瑞鳖的心脏和肝脏取样、分离细菌,人工感染方法确定分离菌株的致病性,细菌鉴定采用API 20NE生化鉴定和16S rRNA分子鉴定相结合的方法进行,PCR扩增法对菌株的溶血素基因(hemolysin gene,hly)、气溶素基因(aerolysin gene,Aer)、细胞兴奋性肠毒素基因(cytotonie enterotoxin gene,Alt)、细胞毒性肠毒素基因(cytotoxic enterotoxin gene,Act)、黏附素基因(major adhesin gene,ahal)和丝氨酸蛋白酶基因(serine protease gene,ahp)6种毒力基因进行检测.结果显示,从患病山瑞鳖心脏和肝脏中共分离到4株优势菌SRB125、SRB142、SRB143和SRB345,对健康山瑞鳖的平均致死率为97.50％～100.00％,是引起山瑞鳖细菌性败血症的病原菌;生化和分子鉴定结果显示,4株分离菌均为嗜水气单胞菌Oeromonas hydrophila),与A.hydrophila L3-5 (KP716701)菌株的亲缘关系最近,同源相似性均达到99.9％;6种毒力基因共包含2种毒力基因型,在4株菌株中的分布为hly +Aer+Alt+Act+ ahaFahp+和hly+A er+A lt+A ct+aharahp-各2株,来源于南宁的SRB143和桂平的SRB345菌株均缺失ahp基因.