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目的:研究吲哚-3-甲醇(I3C)对小鼠骨髓造血细胞辐射损伤的保护作用及机制。方法(1)密度梯度离心法获得CD45.1亚型C57BL/6J小鼠骨髓有核细胞,经0 mol/L、10-8 mol/L~10-3 mol/L I3C处理后,接受不同剂量(0 Gy、1 Gy、4 Gy)的137Csγ-射线照射;继续培养18 h后采用生物发光法检测细胞活力。(2)设空白对照组和10-6 mol/L I3C组,经上述3种剂量射线照射后,接种于甲基纤维素半固体培养基中培养7 d,观察骨髓粒-单核巨噬细胞集落(CFU-GM)形成情况。(3)取24只CD45.2亚型小鼠接受8 Gy 137Csγ-射线照射作为受体,CD45.1亚型小鼠骨髓有核细胞(供体)设空白对照组、4 Gy照射组和4 Gy照射+10-6 mol/L I3C组。将供体与竞争者(CD45.2亚型)骨髓细胞混和后,接种于受体小鼠体内(每组8只),流式细胞术检测受体小鼠外周血细胞中供体来源的细胞比例。(4)细胞设空白对照组、10-6 mol/L I3C组、1 Gy照射组和1 Gy照射+10-6 mol/L I3C组。培养24 h后收集细胞,提取蛋白后Western blot法检测各组核因子NF-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶(HO)-1表达。结果(1)I3C浓度>10-4 mol/L时出现明显的细胞毒性作用(P>0.05);相同剂量射线照射下,10-7~10-6 mol/L I3C可减轻射线对细胞的损伤;因此选取10-6 mol/L为本研究I3C的实验浓度。(2)相同剂量射线照射下,10-6 mol/L I3C组CFU-GM形成数量较空白对照组明显升高(P<0.05)。(3)流式细胞结果显示,4 Gy照射组细胞移植后,受体小鼠外周血中供体细胞比例较对照组明显降低(P<0.05),而10-6 mol/L I3C预处理的供体小鼠细胞移植后,受体小鼠中供体细胞比例较4 Gy照射组升高(P<0.05)。(4)Western blot结果显示,1 Gy照射+10-6 mol/L I3C组Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显高于其他3组(P<0.05)。结论 I3C可以减轻辐射引起的小鼠造血细胞损伤和功能下降,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。
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文献信息
篇名 吲哚-3-甲醇对小鼠骨髓造血细胞辐射损伤的防护作用及其机制
来源期刊 天津医药 学科
关键词 骨髓祖代细胞 辐射损伤 辐射防护 造血干细胞 造血祖细胞 吲哚-3-甲醇
年,卷(期) 2017,(2) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 155-159
页数 5页 分类号 R331.2
字数 语种 中文
DOI 10.11958/20161281
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