雷公藤悬浮细胞原生质体的制备及瞬时转化体系的建立

• 作者: 王睿 胡添源 陈上 马宝伟 高伟 黄璐琦
• 来源期刊: 植物学报
• 关键词: 原生质体 悬浮细胞 瞬时转化 雷公藤
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 774-782
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11983/CBB16171

摘要

为探索药用植物雷公藤(Tripterygium wilfordii)悬浮细胞原生质体提取的最优条件,并建立雷公藤原生质体瞬时转化体系,以雷公藤悬浮细胞为材料,对酶解液配比、酶解时间、甘露醇浓度及处理转速进行考察.用PEG介导的瞬时转化法将外源基因转化到雷公藤原生质体中.结果表明,以雷公藤悬浮细胞为材料提取原生质体的最佳条件是酶液配比为2.0％纤维素酶+0.5％果胶酶+0.5％离析酶,甘露醇浓度为0,6 mol.L-1,酶解10小时,处理转速为67×g;用PEG介导法将含有编码GFP的植物表达载体转化雷公藤悬浮细胞原生质体,激光共聚焦扫描显微镜下细胞显示绿色荧光.通过实验筛选得到雷公藤悬浮细胞原生质体的最佳提取条件,建立了雷公藤悬浮细胞原生质体的瞬时转化体系,为进一步开展雷公藤功能基因及合成生物学研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高伟	首都医科大学中医药学院	67	355	9.0	16.0
3	王睿	首都医科大学中医药学院	8	9	2.0	3.0
4	陈上	首都医科大学中医药学院	4	15	2.0	3.0
5	胡添源	首都医科大学中医药学院	7	18	2.0	4.0
6	马宝伟	首都医科大学中医药学院	3	8	2.0	2.0