A亚群禽白血病病毒env基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

• 作者: 侯继波 唐应华 张雪花 梅梅 秦爱建 胡晓田 陆吉虎
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: A亚群禽白血病病毒 env基因 表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1316-1320
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 2910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2017.06.017

摘要

为获得A亚群禽白血病病毒(ALV-A)env基因的表达产物,以ALV-A AH10毒株病毒RNA为模板,通过反转录PCR扩增得到env基因,将其克隆到转移载体pFastBac1中,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒rBacmid-envA,rBacmid-envA转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒.间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blot)结果显示,重组蛋白可与抗ALV-A抗体发生特异性反应,重组蛋白分子大小约为90000,与预期大小相符,表明env基因在Sf9细胞中获得了良好表达.