可溶性GST-CRH蛋白原核表达条件的优化及纯化

• 作者: 丁辉 刘英富 张益 李光宗 樊毫军 郁硕 陈锋 霍景瑞
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 促肾上腺皮质素释放激素 谷胱甘肽巯基转移酶 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 146-150
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20161302

摘要

目的：通过谷胱甘肽巯基转移酶（GST）-促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）原核表达条件的优化及纯化，获得可溶性好、纯度高的重组GST-CRH蛋白。方法通过对GST-CRH转化菌表达温度、菌液密度（OD600）、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度以及诱导时间的摸索，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测可溶性GST-CRH蛋白的表达情况，GST琼脂糖凝胶进行GST-CRH的纯化，Western Blot对表达的目的蛋白进一步鉴定。结果起始OD6000.8、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、30℃诱导8 h为GST-CRH最优诱导条件；融合蛋白经Western Blot鉴定为表达的GST-CRH，纯化后纯度＞95%。结论建立了GST-CRH的原核表达及纯化方法，获得了高纯度的GST-CRH可溶性蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁辉	武警后勤学院附属医院救援医学研究所	28	81	5.0	7.0
2	李光宗	武警后勤学院附属医院救援医学研究所	8	13	2.0	3.0
3	陈锋	武警后勤学院附属医院救援医学研究所	14	48	4.0	6.0
4	刘英富	武警后勤学院细胞生物学教研室	18	43	4.0	4.0
5	霍景瑞	武警后勤学院附属医院救援医学研究所	2	5	1.0	2.0
6	张益	武警后勤学院附属医院救援医学研究所	5	10	2.0	3.0