摘要:
目的 分析河南省2015年输入性卵形疟原虫富色氨酸抗原(Plasmodium ovale tryptophan-rich antigen,PoTRA)基因序列. 方法 采集河南省2015年22例输入性卵形疟患者的血样,收集患者相关信息.提取血样DNA,用巢式PCR方法扩增PoTRA基因,连接至pMD18-T载体,提取质粒进行测序,在GenBank中进行同源性比对,判断卵形疟原虫的亚种,并对其基因长度及种类进行分析.对PoTRA基因的氨基酸序列进行比对,分析氨基酸的差异.用邻接法构建系统进化树,分析样本间的亲缘关系. 结果22例卵形疟中,8例为卵形疟原虫wallikeri亚种(P.ovale wallikeri),占36.4%,PoTRA基因长度有245和299 bp 2种类型,以245 bp为主;14例为卵形疟原虫curtisi亚种(P.ovale curtisi),占63.6%,PoTRA基因长度有299、317和335 bp等3种类型,以299 bp为主.氨基酸序列比对显示,wallikeri亚种的2种基因类型相差2个氨基酸单元(MANPINMANPIN和AITPIN),curtisi亚种的3种基因类型间相差2个氨基酸单元(TITPIS和TINPIN).系统进化树显示,22例样本分为curtisi和wdlikeri2个亚群,其中curtisi亚群又分为2个亚支,299 bp的样本在同一亚支内,317和335 bp的样本在另一亚支内,亲缘关系更近. 结论 2015年河南省输入性卵形疟有curtisi和wallikeri2个亚种,其PoTRA基因存在多态性,curtisi亚种有3种基因类型,wallikeri亚种有2种基因类型.