基因沉默解离素-金属蛋白酶17(ADAM17)对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞通透性、增殖、迁移以及蛋白表达的影响

• 作者: 刘蓓 刘静 吕伯昌 朱忠桥 杨新光 赵曦泉
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 解离素-金属蛋白酶17 细胞通透性 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 205-209
• 页数: 5页
• 分类号: R774
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2017.0053

摘要

目的 探讨基因沉默解离素-金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17)对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)通透性、增殖、迁移以及蛋白表达的影响.方法 将HRMECs分为4组:正常组(5 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol·L-1 D-葡萄糖)、NC(siRNA阴性对照)+高糖组和si-ADAM17(ADAM17 siRNA)+高糖组.ADAM17表达采用实时定量PCR和蛋白印迹法检测;辣根过氧化酶法检测HRMECs通透性;CCK-8和BrdU检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;蛋白印迹法检测p-EGFR、p-ERK和MMP9表达水平.结果 与正常组相比,高糖组ADAM17蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),NC+高糖组与高糖组相比无明显差异(P＞0.05);与NC+高糖组比较,siADAM17+高糖组ADAM17蛋白表达水平显著下调(P＜0.05).沉默ADAM17可降低高糖环境下HRMECs的通透性.沉默ADAM17可抑制高糖介导的细胞增殖.Transwell实验结果显示,各组相对迁移的细胞数分别为高糖组(157.00±7.93)个、NC+高糖组(169.00±10.12)个、siADAM17+高糖组(121.00±9.28)个、正常组(110.00±8.25)个.沉默ADAM17可抑制高糖介导的细胞迁移.siADAM17+高糖组较NC+高糖组p-EGFR、p-ERK和MMP9蛋白表达显著减少(均为P＜0.01).结论 基因沉默ADAM17可能通过EGFR、ERK、MMP9通路降低高糖诱导的细胞通透性并抑制细胞增殖和迁移.