RNAi沉默p53基因对HeLa细胞核转录因子3表达及其对细胞增殖和侵袭能力的影响

• 作者: 李慧英 李洋
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi沉默 p53 HeLa细胞 核转录因子3 增殖 侵袭
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 分类号: R730.231
• 字数: 3657字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2017.01.009

摘要

目的:探讨RNAi沉默p53基因对宫颈癌HeLa细胞核转录因子3(STAT3)的表达,及对HeLa细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:构建3种靶向p53基因的shRNA1～3序列,并转染HeLa细胞,采用逆转录PCR和Western blot检测细胞p53 mRNA和蛋白的表达,以筛选有效沉默p53的shRNA序列.将筛选的序列转染HeLa细胞后,采用逆转录PCR和Western blot检测STAT3 mRNA和蛋白的表达;采用四甲基噻唑蓝法(MTT)检测细胞增殖;采用Transwell检测细胞侵袭能力.结果:构建的3种p53-shRNA均可沉默宫颈癌HeLa细胞p53的表达,尤以shRNA3的沉默效果最好,转染shRNA3后,HeLa细胞p53 mRNA和蛋白的表达量分别为0.23±0.05和0.41 ±0.11,显著低于未转染组、空质粒组、p53-shRNAl组和p53-shRNA2组(P均＜0.05),故后续试验均以shRNA3转染HeLa细胞.将shRNA3序列转染HeLa细胞沉默p53基因后,p53-shRNA3组STAT3 mRNA和蛋白表达量分别为1.09±0.21和1.46±0.25,显著高于未转染组(0.53±0.10和0.74±0.14)及空质粒组(0.55±0.11和0.73±0.15)(P均＜0.05).MTT法分析结果显示,在孵育24、36、48和72h时,p53-shRNA3组HeLa细胞增殖能力均显著大于未转染组和空质粒组(P均＜0.05).Transwell法分析结果显示,转染12 h后p53-shRNA3组穿膜细胞数目(59.36±5.33)显著高于未转染组(15.73±1.29)和空质粒组(16.01±1.34)(P均＜0.05).结论:RNAi沉默p53基因能够上调宫颈癌HeLa细胞STAT3的表达,并促进细胞的增殖及侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李慧英		1	0	0.0	0.0
2	李洋		1	0	0.0	0.0