斑点叉尾NK-lysin成熟肽在毕赤酵母中的表达

• 作者: 吴慧 陶妍
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 生物学
• 关键词: 斑点叉尾 ( Ictalurus punctatus) NK-lysin成熟肽 毕赤酵母 重组DNA表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 78-83
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4424字
• 语种: 中文

摘要

NK-lysin是毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞产生的具有抗菌作用的多肽,在机体免疫系统中发挥重要作用,被认为是抗生素的理想替代品。 NK-lysin的生物学功能主要由其成熟肽( mNK-lysin)决定。本文在已有斑点叉尾(Ictalurus punctatus) NK-lysin成熟肽原核重组表达载体pET-32a(+)-mNK-lysin的基础上,通过PCR在mNK-lysin的5’端和3’端分别添加EcoRI和XbaI酶切位点,并在3’端添加6× His标签以便于纯化；扩增到的片段与表达载体pPICZαA连接构建重组表达载体pPICZαA-mNK-lysin,转化至毕赤酵母X-33细胞中,通过博来霉素筛选以及对酵母转化子基因组的PCR鉴定得到高拷贝酵母转化子；在29℃,250 rpm,采用0．5%甲醇进行诱导表达；表达产物经固化金属离子亲和层析( IMAC)获得纯化的重组体mNK-lysin。经Tricine-SDS-PAGE分析,其分子量约为11．5 kD；经Western blot分析,证明mNK-lysin在毕赤酵母中成功表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶妍	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	34	379	6.0	19.0
2	吴慧	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	1	3	1.0	1.0