丹参SmIPI基因RNA干扰表达载体构建及遗传转化

• 作者: 尹艳 张夏楠 张宏晨 徐妍妍 高伟
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 丹参 SmIPI RNAi 农杆菌介导
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 324-329
• 页数: 6页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.04.0053

摘要

[目的]构建丹参SmIPI1和SmIPI2基因的RNA干扰植株体系.[方法]利用Gateway技术分别构建SmIPI1和SmIPI2的干扰表达载体pKTGWIWG2D(Ⅱ),并借助根癌农杆菌EHA105菌株介导遗传转化,并通过抗性标记筛选、Egfp荧光和qRT-PCR检测阳性植株和转化效果.[结果]表达克隆构建后转化大肠杆菌菌液PCR检测显示阳性,遗传转化外植体并经抗性培养基继代筛选获得的转化植株根尖在荧光显微镜下呈强烈绿色荧光,且SmIPI1和SmIPI2基因的相对表达量下调幅度分别在64％～82％和23％～78％之间.[结论]成功构建丹参SmIPI1和SmIPI2基因的RNA干扰表达载体并转化丹参植株,为探索SmIPI基因家族成员各自功能问题提供了研究材料基础.