拟南芥蛋白激酶基因BIN2的原核表达纯化及其酶活性分析

• 作者: 刘丹 刘欣 张双喜 王晓峰 陈少林
• 来源期刊: 西北林学院学报
• 关键词: BIN2 SUMO 原核表达 激酶活性
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 林木遗传育种与培育
• 页码范围: 108-112
• 页数: 5页
• 分类号: S718.46
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7461.2017.03.20

摘要

为了研究蛋白激酶BIN2(BR-insensitive-2)的底物及其在BR信号通路中的作用机制,通过One Step Cloning方法将BIN2基因克隆至SUMO表达载体,利用SUMO标签促进目的蛋白表达和折叠的特性,对BIN2蛋白进行原核表达和纯化,进而检测BIN2的激酶活性.结果表明,纯化得到的BIN2具有自身磷酸化活性,并测得其酶活大小和动力学曲线.为进一步研究BIN2蛋白的作用机制提供了基础材料.