大鼠原代肝细胞与枯否细胞同步分离的优化研究

• 作者: 何瑞曦 叶茜 朱瑞 李鑫 陈卫东 陈鑫
• 来源期刊: 中南药学
• 学科: 医学
• 关键词: 原代肝细胞 枯否细胞 原位灌注 密度梯度离心 选择性贴壁
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 150-154
• 页数: 5页
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.7539/j.issn.1672-2981.2017.02.004

摘要

目的 优化分离培养高纯度的大鼠肝细胞与枯否细胞,为肝细胞与枯否细胞的共同培养提供实验细胞.方法 ①原位胶原酶灌注法分离细胞;②Percoll液不连续密度梯度离心法分离枯否细胞;③选择性贴壁纯化枯否细胞;④台盼蓝拒染法判定细胞活力,PAS染色法鉴定肝细胞,墨汁吞噬及CD68免疫染色法鉴定枯否细胞.结果 通过改良的原位胶原酶灌注法,不连续密度梯度离心法以及选择性贴壁法等手段,成功实现了肝细胞与枯否细胞的同时分离,且所分离出的2种细胞的得率与纯度均达到后续实验所需细胞的要求.结论 通过该创新方法同时分离肝细胞与枯否细胞是有效可行的.