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摘要:
目的:GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建.方法:GIP受体激动剂能刺激胰岛素分泌,可作为治疗Ⅱ型糖尿病的潜在药物,因此,GIP受体激动剂的筛选模型十分重要.本研究采用PCR的方法扩增GIPR基因,将扩增产物酶切回收后与表达载体pCMV6-AC-GFP连接,构建pCMV6-AC-GIPR-GFP重组质粒,转化大肠杆菌DH5α经菌落扩增、质粒提取及序列测序重组质粒;利用脂质体lipofectamine2000转染重组质粒到RIN-m5F细胞中,通过抗生素G418筛选,挑单克隆得到稳定的RIN-m5F/GIPR-GFP细胞株.结果:结果表明PCR扩增获得长度为1319 bp的GIPR基因,克隆至pCMV6-AC-GFP真核表达载体,经菌落PCR酶切鉴定及序列分析后,证实质粒pCMV6-AC-GIPR-GFP构建成功;通过荧光显微镜观察到细胞内荧光分布均匀,表明重组质粒成功转到RIN-m5F细胞中.该细胞株经阳性对照(D-Ala2)GIP处理后,与对照组对比,具有荧光斑点聚集.结论:因此,GIP受体激动剂筛选模型RIN-m5 F/GIPR-GFP成功构建,可用于筛选新的GIP受体激动剂,为糖尿病药物开发提供新的筛选模型.
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文献信息
篇名 GIP受体激动剂类药物筛选模型的构建
来源期刊 激光生物学报 学科 生物学
关键词 GIP受体激动剂 药物筛选模型 GFP RIN-m5F 质粒转染
年,卷(期) 2017,(6) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 534-539
页数 6页 分类号 Q785|Q631
字数 2811字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1007-7146.2017.06.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘东波 湖南农业大学园艺园林学院 46 445 15.0 18.0
5 周海燕 湖南农业大学园艺园林学院 35 197 8.0 12.0
7 谢红旗 湖南农业大学园艺园林学院 18 77 6.0 8.0
8 吴艳阳 湖南农业大学食品科学技术学院 5 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
GIP受体激动剂
药物筛选模型
GFP
RIN-m5F
质粒转染
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
激光生物学报
双月刊
1007-7146
43-1264/Q
16开
长沙市湖南师范大学生命科学学院内
42-194
1992
chi
出版文献量(篇)
2554
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16619
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