家蚕类ω3-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、表达及功能研究

• 作者: 于海彦 周志峰 桂仲争 贾俊强
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 ω3-脂肪酸脱氢酶 基因克隆 酿酒酵母表达系统 表达谱 多不饱和脂肪酸合成 诱导表达
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 577-586
• 页数: 10页
• 分类号: S881.2+4|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2017.04.006

摘要

ω3-脂肪酸脱氢酶是生物体内催化多不饱和脂肪酸合成的关键酶之一,其表达受生物胁迫和非生物胁迫因素的影响.从家蚕蛹中克隆了类ω3-脂肪酸脱氢酶基因(BmFAD3-like),该基因具有一个长度为1 083 bp的开放阅读框,编码由360个氨基酸残基组成的分子质量为41.5 kD的蛋白质.将该基因克隆到pYES2.0载体,构建重组表达载体pYBmFAD3-like及重组酿酒酵母工程菌株YBmFAD3-like后进行诱导表达,收集菌体提取脂肪酸,经气相色谱检测表明异源表达的重组BmFAD3-like能够将诱导表达体系中加入的外源底物亚油酸(LA)转化为α-亚麻酸(ALA).半定量RT-PCR检测BmFAD3-like基因mRNA几乎在家蚕5龄第3天幼虫的所有组织中都有转录,在5龄幼虫期、蛹期和蛾期的转录水平较高,并且其转录水平受低温(0℃)和真菌(球孢白僵菌Beauveria bassiana)侵染(6～36 h)诱导显著上调.对家蚕蛹体注射siRNA沉默目的基因12～72 h后,BmFAD3-like mRNA转录水平显著下调.研究结果表明,BmFAD3-like的表达产物能催化LA在)3位脱氢生成ALA,并且该基因在蚕体受到低温诱导和真菌侵染等胁迫时显著上调表达,外源siRNA能够介导该基因的沉默,显著下调其转录水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾俊强		52	242	10.0	14.0
2	桂仲争		37	364	12.0	18.0
3	周志峰		6	15	2.0	3.0
4	于海彦		1	0	0.0	0.0