6株铜绿假单胞菌噬菌体的分离及其生物学特性

• 作者: 张凡 李志斌 李玉民 柳鹏程 王海民 陈昊 马兴铭
• 来源期刊: 兰州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 噬菌体 裂解谱 最佳感染复数 代谢动力学
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-34
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9
• 字数: 3993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13885/j.issn.1000-2812.2017.06.007

摘要

目的 分离铜绿假单胞菌噬菌体,比较其形态、裂菌特性并测定其裂解谱,根据裂解谱筛选出裂解百分比最高的噬菌体,并测定其最佳感染复数和体内代谢动力学等基本生物学特性.方法 取兰州市区污水样品经0.22 μm滤膜过滤,用双层琼脂平板培养法分离、纯化铜绿假单胞菌噬菌体并测定其裂解谱;纯化后的噬菌体进行扫描电镜观察;评估裂解谱后筛选出裂解百分比最高的为PaP106,分别按照感染复数(MOI) =10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7比例加入PaP106和铜绿假单胞菌共培养后测定噬菌体滴度,确定其最佳感染复数;不同途径(腹腔、肌肉、皮下)给小鼠注射1×1010pfu/mL PaP106 100 μL,分别于0.5、1、3、6、12、24、36h测定小鼠血液、肝脏、脾脏组织中噬菌体的浓度,分析噬菌体体内代谢动力学变化.结果 共分离到6株形态不同的铜绿假单胞菌噬菌体,对铜绿假单胞菌耐药菌株的裂解百分比为25％-75％,其中PaP106噬菌体对铜绿假单胞菌耐药菌株的裂解百分比最高(75％),PaP106噬菌体的最佳感染复数为1×10-6,腹腔注射PaP106噬菌体后,其在血液、肝脏、脾脏的达峰时间短于皮下注射和肌肉注射途径.结论 在分离得到的6株铜绿假单胞菌噬菌体中,PaP106噬菌体裂解性强、裂解谱宽,腹腔注射噬菌体后血液、肝脏、脾脏的分布及达峰时间最快,为今后临床治疗感染多重耐药铜绿假单胞菌提供了理论基础.