在单个磁珠的水平上探究磁珠的有效免疫反应体积

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 医学
• 关键词: 单个磁珠有效免疫反应体积(NEIV) 免疫磁珠 酶联免疫吸附测定(ELISA) 磁珠直径 孵育方式
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 页码范围: 845-853
• 页数: 9页
• 分类号: R782.2
• 字数: 725字
• 语种: 英文

摘要

目的:通过探究单个磁珠的有效免疫反应体积(NEIV),在微观水平上揭示磁珠的免疫反应过程,为大体积样本检测过程中磁珠的用量提供理论指导.创新点:首次提出"单个磁珠的有效免疫反应体积"这一概念,提出在微观水平上对磁珠免疫反应进行探究,为进一步研究磁珠-抗原免疫反应的动力学过程打下基础.方法:首先,采用两种直径的磁珠对50μl不同浓度的抗原进行比色检测,证明磁珠上抗原的结合位点过量.随后,采用定量磁珠对相同浓度不同体积的抗原进行检测,得出"单个磁珠的有效免疫反应体积"这一概念.接着,采用三种不同用量的磁珠对浓度相同、体积梯度增大的抗原进行检测,以验证所提出的NEIV的概念.然后,通过测定孵育时长、孵育温度和震荡与否对比色结果的影响,找到对NEIV影响的关键因素.最后采用定量磁珠,对梯度稀释的抗原进行检测,建立磁珠用量与比色结果的关系,对NEIV的实际应用提出展望.结论:对于同一直径的磁珠,在相同的孵育条件下,其单个磁珠的NEIV是恒定的,与磁珠用量和孵育体积无关.孵育温度、孵育时长和震荡与否是影响NEIV值的关键因素.采用NEIV这一参数可以在大体积样本检测之前,对磁珠的用量模拟提供有效指导.除此之外,NEIV更从微观角度上揭示了磁珠和抗原的免疫反应过程,为进一步研究磁珠-抗原免疫反应的动力学过程奠定了基础.